中科院硕士论文：转基因大豆导致水产动物肌体炎症！

　　

　　：过路道人

　　

　　核心提示：中国科学院研究生院（海洋研究所）的硕士论文：《饲料中转基因成分检测及对水产动物安全性评价的初步研究》及相关论文《进口转基因大豆（Roundup Ready）对吉富罗非鱼生长和生理的影响》指出，将含有30%转基因豆粕的罗非鱼饲料,饲喂罗非鱼，仅仅经过数小时后，转基因大豆中的外源基因片段能在胃肠道中检出，四周后的检测则发现已经侵入到了罗非鱼肌体内部，7周后则导致罗非鱼肌体内部产生炎症！研究显示，在罗非鱼心脏、肝脏、肠、胃、卵巢、精巢、脑、鳃丝、脾脏、胆囊、肌肉等不同部位的DNA中都能检测到外源基因的存在。该研究还指出，采用巢式PCR检测方法对市场上的豆制品进行检测，结果发现，市场上有46.5%的豆制品被检测出含有转基因成分。

　　

　　另外，根据中科院网站的道称，由海洋生物技术研究与开发中心刘梅、王雷等承担的青岛市科技发展项目“转基因作物检测及安全性评价方法的研究”通过验收和成果鉴定。从成果的内容判断，该成果的核心内容与这篇硕士论文的主要研究内容非常一致。道指出，该项目首次研究了转基因大豆对罗非鱼生理生化指标的影响、转基因大豆中外源基因在罗非鱼各组织中的分布以及外源基因在养殖水体微生物间的漂流。鉴定委员一致认为，研究成果总体达到国际先进水平。

　　

　　中国科学院硕士论文：饲料中转基因成分检测及对水产动物安全性评价的初步研究

　　

　　：陶冉

　　

　　信息一：

　　

　　中国科学院硕士论文：饲料中转基因成分检测及对水产动物安全性评价的初步研究

　　信息二：

　　

　　与本论文相关的、由论文发表的相关论文之一：摄食转基因大豆罗非鱼各组织中转基因成份的检测研究

　　信息三：

　　

　　与本论文相关的、由论文发表的相关论文之二：进口转基因大豆（Roundup Ready）对吉富罗非鱼生长和生理的影响

　　【摘要】： 自转基因作物问世以来,转基因产品的安全性问题一直是人们关注的焦点。本文根据GenBank中登录的转基因大豆完整外源DNA序列设计了几对引物,对转基因大豆进行了巢式PCR检测。结果表明,巢式PCR可以扩增10-10g/μl浓度的DNA溶液,检测灵敏度高达0.01%。该巢式PCR技术具有高度特异性、灵敏度和很好的重复性。用巢式PCR对部分市售的水产饲料和豆制食品进行检测,90.6%的水产饲料和46.5%的食品能检测出外源基因片段,表明转基因大豆广泛存在于水产饲料和我们的日常食品中,为食品安全分析和管理提供了方法和依据。环介导的等温扩增技术(LAMP)依赖于能够识别靶序列上6个特异区域的引物和一种具有链置换特性的DNA聚合酶,在等温条件下可高效、快速、高特异地扩增靶序列。本研究建立了转基因大豆的LAMP扩增技术,针对豆制品以及饲料的转基因LAMP检测技术正在研究和开发中。 利用转基因和非转基因豆粕制作的饲料,喂养吉富罗非鱼,分别于4周、7周取样,对其体重和血液指标进行了检测。实验显示,投喂转基因饲料7周以后,增重率和血清指标,转基因组与非转基因饲料组相比没有显著差异。全血指标中白细胞数目、大血小板比率、平均血小板体积和血小板体积分布宽度4项指标显著高于非转基因饲料组,而且差异达到极显著水平。由以上结果可见,转基因大豆与非转基因大豆相比,对罗非鱼的一些生理过程造成了一定的影响,但是并未对其生长造成可见的影响。分别于投喂1h、4h和8h以后取罗非鱼胃内容物、肠道内容物和粪便,并分别于4周、7周和继续饥饿2周后,取罗非鱼不同组织,提取DNA,用巢式PCR法检测转基因大豆中的外源基因在各种组织中的分布,结果显示在胃内容物、肠内容物、粪便、心脏、肝脏、胃、肠、卵巢、精巢、脑、鳃丝、脾脏、胆囊、肌肉等不同部位的DNA中都能检测到外源基因的存在,说明转基因大豆中的外源DNA并不能被罗非鱼的消化道完全降解,其DNA片段可能通过消化吸收转移到鱼体的各种组织。在投喂转基因饲料7周以后以及停止投喂饥饿2周以后分离水体中的微生物,提取其DNA,进行转基因检测。结果显示在所分离纯化的各种微生物中都没有检测到转基因大豆中外源基因35S-EPSPS的存在。

　　

　　【关键词】：转基因大豆 检测 巢式PCR 罗非鱼 安全性评价

　　

　　【学位授予单位】：中国科学院研究生院（海洋研究所）

　　

　　【学位级别】：硕士

　　

　　【学位授予年份】：2008

　　

　　【分类号】：S963

　　

　　【目录】：

　　

　　中文摘要5-6

　　

　　Abstract6-8

　　

　　引言8-9

　　

　　1 前言9-27

　　

　　1.1 全球转基因作物的发展现状9-10

　　

　　1.2 转基因作物的安全性问题10-14

　　

　　1.3 转基因检测技术的研究进展14-20

　　

　　1.4 巢式PCR(nested PCR)和环介导的等温扩增技术(LAMP)简介20-22

　　

　　1.5 本研究的必要性、主要内容和意义22-27

　　

　　2 转基因作物及水产饲料的检测27-39

　　

　　2.1 材料和方法27-33

　　

　　2.2 结果和分析33-39

　　

　　3 含有转基因成分的饲料对水产动物安全性评价的初步研究39-51

　　

　　3.1 材料和方法39-40

　　

　　3.2 结果和分析40-51

　　

　　4 结论和讨论51-59

　　

　　4.1 样品DNA 提取方法51

　　

　　4.2 转基因作物及其产品的PCR 检测51-53

　　

　　4.3 转基因大豆的 LAMP 检测53-54

　　

　　4.4 转基因饲料的检测54

　　

　　4.5 转基因饲料对罗非鱼生长和生理的影响54-56

　　

　　4.6 转基因大豆外源基因在罗非鱼体内各组织器官的残留以及在养殖水体微生物的漂移56-59

　　

　　5 实验总结59-60

　　

　　5.1 创造性成果59

　　

　　5.2 存在的问题与建议59-60

　　

　　参考文献60-68

　　

　　发表论文目录68-69

　　

　　致谢69

　　

　　附文一：进口转基因大豆（Roundup Ready）对吉富罗非鱼生长和生理的影响

　　

　　

　　

　　

　　附文二：转基因作物检测及安全性评价方法研究取得进展